80，程序降温盒多久能降到

程序性凍存盒4個小時能到-80，走程序降温盒過程，在—80度存放4個小時就可入液氮(程序降温盒在一個半小時即可從室温降至—80度)。

程序降温盒一個半小時能降到-80。

程序降温盒是一般最廣泛使用的降温法，為一種特製冷凍容器，使細胞以每分鐘約-1攝氏度的速度降至-80攝氏度（過夜），然後移至液氮中保存。

程序降温盒運用於各種細胞類型，包括幹細胞，原代細胞、細胞系和酵母等。

程序降温盒不需要任何液體及添加劑的輔助，只需要放入到超低温冰箱，就能確保降温盒中樣品的降温速率為每分鐘-1攝氏度，是一個非常理想的細胞保存組合。

產品採用徑向對稱設計配合複合泡沫及貴重合金，具有零添加零排放的特點，並且不需要更換任何部件就能永久性使用，真正響應到綠色環保的號召。

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程序性凍存盒多久能到-80

程序性凍存盒多久能到-80，程序性凍存盒4個小時能到-80，走程序降温盒過程,在—80度存放4個小時就可入液氮(程序降温盒在一個半小時即可從室温降至—80度)。另有書中提到走泡沫盒子的程序,細胞置於—80度冰箱可最長達一週時間。

程序降温盒放室温多久可以用

將程序降温盒放入-80℃冰箱,冷凍4小時以上以達到凍存效果即可使用。

程序性降温時間

程序性降温時間16-18h。程序性降温：4℃10min，-20℃30min。-80℃16-18h。程序性降温主要是通過微處理器控制系統和電磁閥，控制噴入腔體中的液氮量來精確控制降温速率。其優點是：控温精確，受外界環境影響小，尤其是處理大體積樣本時，快速噴入的大量液氮更易帶走樣本中的潛熱，從而快速降温，保證更好的樣本復甦活性。

程序降温盒能放-20嗎

不能。

程序降温盒：液氮或低温儲存（只要低於-135℃即可）。程序降温盒：是一般最廣泛使用的降温法，為一種特製冷凍容器，使細胞以每分鐘約-1℃的速度降至-80℃（過夜），然後移至液氮中保存。

程序降温盒中途若是打開會怎麼樣

温度升高。破壞盒中細胞。程序降温盒使用的降温法，為一種特製冷凍容器，使細胞以每分鐘約-1℃的速度降至-80℃（過夜），然後移至液氮中保存。再冷凍的過程中不能開盒，開盒會使温度升高，破壞盒中培養的細胞。導致實驗結果有誤差甚至失敗。

異丙醇凍存盒放-80冰箱棟多久

8小時。將凍存管放入異丙醇降温盒，再將降温盒放入零下80度的冰箱，8小時後，利用異丙醇比熱容大的特點，使被凍存的細胞實現緩慢降温。冰箱是保持低温的一種器具，通過使食物或其他物品保持恆定低温冷態以避免其。

細胞放在凍存管裏然後放程序降温盒裏，但是沒有立刻放-80……

會有些影響，在活率方面。70%的細胞應該沒問題。

1）傳統方法: 凍存管置於4℃ 40min--->-20℃ 30min--->-80℃ 16～18h

(或隔夜)--->液氮中長期儲存。

注意：-20℃不可超過1小時，以防止胞內冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

（2）程序降温：利用已設定程序的程序降温儀以-1～-3℃/min的速度由室温降至（-80℃以下）-120℃，再放在液氮中長期儲存。

細胞培養|細胞凍存技術原理

1. 細胞凍存是將細胞儲存在低温環境中，減少細胞代謝，實現長期儲存的一種技術。

2. 在大多數細胞系中，細胞會隨着衰老和演化不斷的積累改變，造成表型和基因型的“培養漂移”，在凍存過程中，適當的操作和合適的凍存條件可以減少細胞特性的改變或丟失，起到細胞保種的作用。因而，正確且成功的凍存對於細胞的長久應用起着非常重要的作用。

1. 當温度低至-70℃時，細胞內的酶活性全部停止，代謝活動停止，故實現長期保存的目的。

2. 隨着温度降低，細胞內外的水分都會結晶，所形成的冰晶會造成細胞膜和細胞器的破壞，從而引起細胞死亡，特別是0~-20℃的階段，冰晶呈針狀，及其引發細胞損傷。在不加任何保護劑條件下直接凍存細胞時，細胞內和外環境中的水都會形成冰晶，能導致細胞內發生機械損傷、電解質升高、滲透壓改變、脱水、pH改變、蛋白變性等，能引起細胞死亡。

3. 常見的冷凍保護劑是甘油或二甲基亞碸（DMSO）。DMSO能快速穿透細胞膜進入細胞，降低冰點，延緩凍存過程，同時增加細胞膜的通透性，提高細胞內離子濃度，減少細胞內冰晶的形成，從而達到保護細胞的目的。

1. 細胞凍存中， 一般使用DMSO 作為保護劑。在細胞凍存中， DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ，某種具體細胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。

2. 對特別敏感的細胞在凍存時需測試適用的凍存液。例如神經元細胞凍存時需選擇無血清凍存液，避免復甦後分化。

· 有限細胞系形態及代謝活動維持

· 珍貴細胞保種

· 細胞株標準品製備

· 臍帶血幹細胞、NK細胞凍存

1. 用來凍存的細胞一般選擇在細胞對數生長期，匯合度約 90% 的時候，這時細胞生長狀態好，細胞數量也多，並且在收穫細胞前 24 小時換一次培養液。

2. 對培養物進行微生物污染物檢測，特別是支原體，確保細胞沒有任何的污染。在細胞的收集過程中，實驗操作要儘可能的温和，避免細胞受損。

1. 細胞的冷凍速率最適控制在讓細胞有足夠的時間脱水而又不被過度脱水導致細胞損害。對大多數細胞來説，每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。

2. 梯度降温法：4℃-30 min，20℃- 2h，-80℃冰箱冷凍過夜，次日將凍存管轉移到液氮罐中長期保存。

3. 細胞程序降温盒，將準備好的細胞凍存管放進凍存盒，直接在-80℃過夜後就可以轉移至液氮罐中。

4. 在轉移存放位置的過程中一定要迅速，轉移時建議將凍存管放在乾冰中恆温，儘量避免轉移過程因温度變化對細胞活力的影響。

1. 細胞也可以在-80℃冰箱保存幾個月左右的時間。

2. 細胞長期保存温度是 -130 ℃或更低。

3. 液氮罐中氣態層温度在 -140℃至 -180℃之間，細胞可保存在氣態層或浸入液氮中，如果可能最好保存在氣態層，因為這樣可避免由於有液氮進入凍存管而在拿出細胞時引起爆炸(但是這樣液氮罐內只能存儲少量液氮，需要經常添加)。

HyCyte™凍存液是一種即用型、無血清、無需程序降温的細胞“長期”凍存液，該產品配方使用已超過15年，原料均從日本進口，凍存品質與日本產品一致。

·  安全： 無血清，不含異種動物成份

·  廣譜： 適合多種細胞類型

·  高效： 復甦後細胞保持高活性及快速增殖  能力，不影響細胞功能

·  方便： 即用型，無需額外配製，無需程序降温盒及稀釋

細胞膜保護劑—可在細胞膜外瞬間形成一層保護膜，保護細胞不受細胞外冰晶的損害。

滲透性保護劑—可迅速滲透至細胞內部，防止細胞內部產生大量冰晶，同時可保護細胞器，減少其在低温下的損傷。

細胞沉降穩定劑—可平衡細胞沉降速度，防止細胞在凍存過程中聚集成團。

用梯度降温凍存盒降温需要多長時間降到

異丙醇易揮發，並且容易吸收空氣中的水分，所以在冷凍細胞的過程中可以輔助實現緩慢降温，直接從室温放進-80可以達到近似於1度/分鐘。

細胞凍存盒中的異丙醇的作用是什麼？為什麼可以直接放在負80的冰箱中，自己就可以緩慢降温呢？ 緩慢

一般凍存盒中加入甘油的居多吧。丙二醇，異丙醇加入後，一方面防止由於溶液效應而使細胞脱水及蛋白質變性；另一方面在稍低於溶液冰點時人工強行誘導結冰，以免出現溶液過冷現象，防止結冰時釋放潛熱引起温度回升，以及形成大的冰晶，減輕對細胞的損傷。在一步冷凍中．選用高濃度的滲透性保護劑組成的玻璃化溶液，在冷凍過程中，不發生結晶而形成玻璃樣固體，維持液態時的正常分子與離子分佈，使細胞內發生玻璃化而起到保護作用。