酶動力學參數如何測定

酶動力學參數的測定方法：

1、取50毫升三角瓶4個，加入5毫升甲醛與一滴酚酞，以標準氫氧化鈉滴定至微紅色，四個瓶顏色要一致，編號；

2、取量40克每毫升酪蛋白50毫升，加入一150毫升三角瓶，37攝氏度保温10分鐘，同時胰蛋白酶也在37攝氏度保温10分鐘，然後吸取5毫升酶液加到酪蛋白液中，充分混合後立即取出10毫升反應液，加入一含甲醛的三角瓶中作為1號，在2,4,6分鐘時分別取出10毫升反應液，加入2,3,4號小三角瓶中；

3、在小三角瓶中分別加10滴酚酞，用氫氧化鈉滴至微紅，在接近終點時，按耗去氫氧化鈉的毫升數，每毫升加一滴酚酞，在繼續滴至終點，記下耗去的氫氧化鈉的毫升數；

4、以滴定度對時間作圖，得一條直線，其斜率即為初速度r1；

5、分別量取30克每升、20克每升、10克每升的酪蛋白溶液，重複上述操作，分別測出r2、r3、r4；

6、用以上結果作圖求出還參數。